Filtry wirówkowe Nanosep® Pall (Cytiva) służą do ultrafiltracji i zatężania próbek o małej objętości (<0,5 ml) i są przeznaczone do stosowania w standardowych wirówkach laboratoryjnych dla probówek o poj. 1,5 ml. Zastosowana membrana ultrafiltracyjna Omega™ (modyfikowany polieterosulfon PES) wspiera szybkie zatężanie i oczyszczanie próbek, ułatwiając sprawne przygotowanie materiału do kolejnych etapów analizy.
Zastosowania filtrów Nanosep® Pall (Cytiva)
Sprawdzają się w zatężaniu, oczyszczaniu i odsalaniu oligonukleotydów oraz DNA i RNA. Mogą być wykorzystywane w reakcjach PCR, w tym do zatężania produktów PCR, a także w procedurach obejmujących izolowanie DNA z żelu agarozowego oraz separację oligonukleotydów i RNA z żeli akrylamidowych. Filtry te nadają się również do przygotowania próbek białek do analiz takich jak HPLC oraz LC/MS.
Parametry użytkowe filtrów wirówkowych Pall
Maksymalna objętość próbki wynosi 500 µl, a objętość końcowa koncentratu to 15 µl. Efektywna powierzchnia filtracji wynosi 0,28 cm², a objętość martwa to 5 µl, co sprzyja efektywnemu odzyskowi próbki. Dopuszczalna siła odśrodkowa podczas wirowania wynosi do 14 000 × g, natomiast w zastosowaniach z kwasami nukleinowymi zaleca się stosowanie siły odśrodkowej do 5 000 × g. Zakres dopuszczalnych warunków użytkowania obejmuje pH 1-14 oraz temperaturę 0-40°C. Filtry są fabrycznie niesterylne, przed użyciem można je sanityzować poprzez przefiltrowanie 70% etanolu.
Elementy konstrukcyjne wykonano z polipropylenu. Zastosowanie ultradźwiękowego scalania ogranicza ryzyko nieszczelności w trakcie wirowania.
Dobór MWCO i dostępne warianty
Dobór membrany opiera się na parametrze MWCO, czyli wartości odcięcia masy cząsteczkowej (w kD), rozumianej jako przybliżona masa cząsteczki zatrzymywanej przez membranę w ponad 90%. Dobór odpowiedniego MWCO do konkretnego zastosowania wymaga uwzględnienia m.in. kształtu cząsteczek, ich ładunku elektrycznego, stężenia próbki, składu próbki oraz warunków pracy. Dostępne są warianty MWCO: 3K (szary), 10K (niebieski), 30K (czerwony), 100K (bezbarwny) oraz 300K (pomarańczowy), co ułatwia szybką identyfikację produktu dzięki kodowaniu kolorami.
W ofercie posiadamy również inne serie filtrów wirówkowych Pall: Microsep®, Macrosep® oraz Jumbosep®.
Kompletny przewodnik po filtrach wirówkowych
Jak dobrać najlepszy filtr wirówkowy?
Nanosep – Instrukcja obługi
Źródło: Cytiva. Wszelkie prawa autorskie oraz znaki towarowe pozostają własnością Cytiva. Materiał zamieszczono wyłącznie w celach informacyjnych.
Czym są filtry wirówkowe Pall (Cytiva)?
Filtry wirówkowe Pall (Cytiva) to jednorazowe rozwiązania membranowe do szybkiego przygotowania próbek przy użyciu wirówki – przede wszystkim do zatężania, odsalania i wymiany buforu białek oraz kwasów nukleinowych. Działają na zasadzie filtracji membranowej: podczas wirowania mniejsze cząsteczki i rozpuszczalnik przechodzą przez membranę do filtratu, a większe biomolekuły pozostają w retentacie (czyli części roztworu zasilającego, która nie przeniknęła przez membranę podczas procesu filtracji) ) i ulegają zatężeniu. Dzięki niskiemu poziomowi wiązań niespecyficznych i wysokiej przepustowości pozwalają uzyskać czysty produkt z odzyskiem zwykle >90% w kilka minut.
Co daje filtr wirówkowy w praktyce?
- krótki czas pracy (zwykle kilka minut),
- wysoki odzysk próbki (często >90%),
- wygoda: kilka formatów pojemności (od ~50 µl do 60 ml) i szeroki dobór membran/MWCO,
- mniejsze ryzyko strat – membrana działa jak uszczelka i ogranicza przeciekanie filtrowanego roztworu i minimalizuje straty próbki.
Jakie są dostępne serie filtrów wirówkowych Pall (Cytiva)?
W ofercie Pall/Cytiva znajdziesz kilka głównych serii filtrów wirówkowych, dobieranych przede wszystkim pod kątem objętości próbki i zastosowania: Nanosep®, Microsep®, Macrosep® oraz Jumbosep®. To ułatwia wybór odpowiedniego filtra do pracy z wirówką – od mikroobjętości po większe próbki laboratoryjne.
W ramach serii występują też warianty pod konkretne zadania: Nanosep (ultrafiltracja, membrana Omega), Nanosep MF (mikrofiltracja – np. do usuwania cząstek, membrany Bio-Inert i wwPTFE), Nanosep NAB (wiążące DNA/RNA – włókno szklane), a w przypadku większych formatów spotkasz wersje Microsep Advance i Macrosep Advance z membraną Supor (w katalogu wskazane m.in. przy zastosowaniach z DMSO).
Do jakich zastosowań można użyć filtrów wirówkowych Pall? (najczęstsze zastosowania)
- zatężanie białek lub DNA/RNA, oligonukleotydów
- odsalanie i szybka wymiana buforu,
- oczyszczanie primerów i produktów PCR,
- izolacji kwasów nukleinowych (DNA) z żelu agarozowego
- separacja oligonukleotydów, RNA z żeli akrylamidowych
- klarowanie lizatu komórkowego/homogenatu (mikrofiltracja),
- usuwanie małych zanieczyszczeń (np. wolnych nukleotydów), a także prace związane z wirusami (zatężanie/usuwanie – zależnie od doboru membrany).
Jak dobrać filtr wirówkowy Pall?
Dobór filtra wirówkowego (Pall/Cytiva) zacznij od tego, co chcesz uzyskać: do zatężania, odsalania i wymiany buforu wybiera się filtry do ultrafiltracji (dobór MWCO w kDa), a do klarowania i usuwania cząstek stałych – filtry do mikrofiltracji (dobór wielkości porów, np. 0,2 µm lub 0,45 µm). Następnie dopasuj format do objętości próbki: od mikroobjętości 50–500 µl (Nanosep), przez do 5 ml (Microsep) i do 20 ml (Macrosep), aż po duże objętości 15–60 ml (Jumbosep).
W ultrafiltracji kluczowy jest MWCO (definiowany jako zatrzymywanie >90% cząsteczki o danej masie) – dla białek zaleca się MWCO 3–6× mniejsze niż masa białka, które chcesz zatrzymać (niższe = lepsza retencja, wyższe = szybszy przepływ). Pamiętaj też, że retencja zależy nie tylko od masy, ale m.in. od kształtu, ładunku, stężenia i składu próbki, więc w wymagających aplikacjach warto zrobić próbę. Jeśli próbka zawiera DMSO, w materiale wskazano kompatybilność filtrów z membraną Supor w wersjach Microsep/Macrosep Advance do 20% DMSO.
- Objętość próbki: dobierz format (np. Nanosep <0,5 ml; Microsep 0,5–5 ml; Macrosep 5–20 ml; Jumbosep 20–60 ml).
- Rodzaj membrany: ultrafiltracja (Omega) do zatężania/odsalania; mikrofiltracja (Bio-Inert, Supor, wwPTFE) do usuwania cząstek; inne materiały do specyficznych zadań.
- MWCO / rozmiar porów: dobierz tak, aby zatrzymać docelową cząsteczkę (często przy białkach wybiera się MWCO kilka razy niższe od masy białka – zależnie od priorytetu: szybkość vs. retencja).
Jakie membrany filtrów są dostępne oraz czym się różnią?
Dostępne są różne typy membran: Omega™ (modyfikowany PES) do ultrafiltracji, a także Bio-Inert®, Supor® (PES) oraz wwPTFE do różnych zadań (np. niskowiążące, szybki przepływ, usuwanie cząstek).
Czym jest MWCO i jak wpływa na filtrację?
MWCO (molecular weight cut-off) to parametr membrany ultrafiltracyjnej określany na podstawie zdolności do zatrzymania >90% cząsteczki o znanej masie (kDa). W praktyce wpływa na to, co zostaje w retentacie, a co przechodzi do filtratu.
Na czym polega kodowanie kolorami?
Filtry są oznaczane kolorami zależnie od MWCO/rozmiaru porów, co ułatwia szybkie rozpoznanie wariantu (np. 10K – niebieski, 30K – czerwony, 0,2 µm – morski).
